Genovis,OmniGLYZOR,G3-OM6-010,041121756
试剂盒 OmniGLYZOR Kit Microspin 10 x 50-100 ug|Genovis|10 x 50-100 ug
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  • 探索编号:
    041121756
  • 原始编号:
    G3-OM6-010
  • 品牌:
    Genovis
  • 包装规格:
    10 x 50-100 ug
  • 货期:
    现货(当天发货) 
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产品概述
OmniGLYZOR™ 含有固定化酶混合物,可快速高效地去除抗体、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的N-糖链以及简单黏蛋白型O-糖链。
糖链的去除被广泛用于降低异质性,以便通过例如质谱等手段促进蛋白质分析。去糖基化也可用于研究糖链的功能作用。
水解 O - 糖链的酶不会因变性而受益,因此 OmniGLYZOR™ 柱仅应在天然条件下使用。
OmniGLYZOR™ 微离心试剂盒提供的材料足够对 1 次 ×50-100 μg、5 次 ×50-100 μg 或 10 次 ×50-100 μg 的糖蛋白进行去糖基化。
产品应用
高效去除 N - 糖链和黏蛋白型 O - 糖链、变性反应条件下的去糖基化。
产品优势
1.快速高效去除 N - 糖链和黏蛋白型 O - 连接糖链。
2.即开即用的离心柱形式 —— 无酶干扰分析。
3.与液相色谱 - 质谱(LC-MS)兼容。
4.固定化形式提高酶与底物比例,实现快速去糖基化。
储运条件
OmniGLYZOR™ 试剂盒低温运输,收到后其内含物应分别在不同温度下储存。
冻干型PNGase F 和RapiGest SF 表面活性剂*与OmniGLYZOR™ 微离心柱一同提供,用于在变性条件下选择性进行PNGase F 降解。
实验案例
N型和粘蛋白型O-聚糖的有效去除:
我们使用两种治疗蛋白作为底物,即高度糖基化的Fc融合蛋白依那西普和促红细胞生成素(EPO),展示了OmniGLYZOR™ 的性能。由于糖链的异质性,完整的分析导致复杂的质谱。 用OmniGLYZOR™ 在37°C下孵育1小时, N-和O-聚糖被有效去除,可以看到未修饰蛋白对应的单峰。对于EPO,由于OmniGLYZOR™ 不能全部有效水解,因此在蛋白质上留下了少量经乙酰化唾液酸修饰的O-聚糖。 也用另一种市售去糖基化产品处理两种底物蛋白,根据制造商的建议(37℃,O/N孵育),数据和比较如下图所示。

变性反应条件下的去糖基化反应:
C1抑制剂是一种人血浆来源的生物治疗药物,由6个N-聚糖和多达28个O-聚糖修饰,主要由唾液酰核心1结构组成。如果没有对这种高度不均一的蛋白质进行预处理,反相LC-MS分析产生了一个复杂的质谱,无法详细解释。在天然条件下使用OmniGLYZOR™ 小柱,所有O-聚糖在3小时内被有效去除。然而,蛋白质上仍有1- 3个N-聚糖。在变性条件下,使用OmniGLYZOR™ 试剂盒中包括的冻干PNGaseF 和MS兼容的RapiGest™ SF表面活性剂,通过额外的去糖基化步骤除去这些难以接近的N-聚糖。观察到除分子上少量的核心2 O-聚糖外,所有的聚糖都被完全去除。

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